ETUDE DE L’ ACTIVITE BRONCHORELAXANTE
DE L’ EXTRAIT HYDROALCOOLIQUE

ETUDE CHIMIQUE 

Rendement de l’extraction

Après le broyage, l’extraction hydroalcoolique de FAT1 a été réalisé et 150 g de broyat donne 12.15g d’extrait, soit un rendement de 8.1% de EHA/FAT1. 

Composition chimique de EHA/FAT1

Les résultats du screenning phytochimique montrent la présence d’une forte concentration de Tanins, de Quinones , de Stéroïdes et de Polysaccharides dans l ‘EHA/FAT1. On note l’absence de Polyphenols, de Flavanes , Flavonols et de Saponines (Tableau II) Tableau II : Résultats du screenning phytochimique de EHA/FAT1 Familles chimiques Présence relative Tanins +++ Quinones +++ Stéroïdes +++ Polysaccharides +++ Stérols insaturés ++ Flavanones et flavanols + Leucoanthocyanes et anthocyanes + alcaloïdes – Flavanes et flavonols – polyphénols – triterpenoïdes – Stéroïdes lactoniques – Desoxy-2-sucre – saponines – Légendes : +++ :présence à forte concentration ++ : présence à moyenne concentration + : présence à faible concentration – : absence 

ETUDE PHARMACOLOGIQUE 

Effet relaxant de EHA/FAT1 sur la trachée isolée précontractée par l’Histamine, l’Acétylcholine et KCI. Quand l’Histamine à 2×10-5 M a été utilisée pour précontracter la trachée, l’EHA/FAT1 exerce un effet relaxant concentration dépendant avec une valeur de CE50 de 0,29 ±0.03 mg /ml (n=4). De même quand KCl à 40mM et Acétylcholine à 2×10-5 M ont été utilisés pour précontracter l’organe, l’EHA/FAT1 produit également un effet relaxant avec des valeurs de CE50 égale à 0,72 ±0.005 mg/ml (n=4)vis à vis de KCl et 0,96 ±0.47 mg/ml (n=4) pour l’ Acétylcholine.(tableau III) La figure 1 montre les courbes effet-relaxant de EHA/FAT1 sur la trachée isolée précontractée par ces 3 agents. Ces résultats montrent que l’EHA/FAT1 relâche le muscle lisse trachéal de façon concentration dépendante. Mais en comparant les valeurs de CE50, cet extrait est plus actif sur la trachée précontractée par l’Histamine. Tableau III : Valeurs de CE50 de EHA/FAT1 sur la trachée isolée précontractée par l’Histamine, KCl et Acétylcholine (X ±s.e.m ; n=4) agents Histamine 2 ×10-5M KCl 40 mM ACh 2 ×10-5M CE50 (mg/ml) 0,29 ± 0.03 0,72 ± 0.001 0,96 ± 0.47 16 0 20 40 60 80 100 0,01 0,1 1 % r e l a x a t io n [EHA/FAT1] mg/ml Figure 1 : Courbe effet-concentration de EHA/FAT1 sur la trachée isolée précontractée par différents agents (Histamine, KCl, Acétylcholine) (Les barres verticales représentent les écart-types de la valeur moyenne avec n=4) KCl 40mM Acetylcholine2×10-5M Histamine 2×10-5M 17 2- Mécanisme d’action de l’effet relaxant de EHA/FAT1 a- Effet inhibiteur de EHA/FAT1 sur la réponse contractile de l’Histamine L’Histamine contracte la trachée de façon concentration dépendante avec une valeur de CE50 de 2,59±3.10-6 M et Emax est atteint à la concentration de 10-4M (figure 2). Testé sur la trachée isolée de cobaye, EHA/FAT1 à 0,1 mg/ml et 0,5 mg/ml déplace la courbe effetconcentration de l’Histamine vers la droite avec Emax déprimé. Le tableau IV présente la variation significative des valeurs de CE50 en absence et en présence de EHA/FAT1. Ainsi, EHA/FAT1 inhibe la contraction produite par l’Histamine de façon concentration dépendante avec dépression de Emax. La valeur de CI50 de l’extrait est de 0,25±0,05 mg/ml. Tableau IV : Variation des valeurs de CE50 et de Emax de l’Histamine en présence et en absence de EHA/FAT1 sur la trachée isolée de cobaye (X ± s.e.m ; n=4 ; ** :p<0.01) Concentration de EHA/FAT1 en mg /ml 0 0,1 0,5 CE50 (Histamine) ×10-6M 2,59 ± 0,3 6,26 ± 0,63** 9,14 ± 1,17** Emax (Histamine)% 100 76,67 ± 3,65** 39,08 ± 10,11** 18 0 20 40 60 80 100 -8 -7 -6 -5 -4 log [Histamine] M % contraction Histamine seule Histamine +[EHA/FAT1]à 0,1mg/ml Histamine +[EHA/FAT1]à 0,5mg/ml Figure 2 : Courbes effet- concentration de l’Histamine en absence et en présence de EHA/FAT1 à 0,1mg/ml et 0,5mg/ml (Les barres verticales représentent les écart-types de la valeur moyenne avec n=4) 19 b- Effet relaxant endothélium-dépendant de EHA/FAT1 Testé sur la trachée isolée pourvue et dépourvue d’endothélium, précontractée à l’Histamine à 10-4M, EHA/FAT1 produit un effet relaxant concentration dépendante (figure 3). La comparaison des valeurs de CE50 de relaxation de l’extrait sur la trachée intacte (0,29±0,03mg/ml) et trachée dénudée (0,54±0,004mg/ml) montrent une différence significative (p<0.005)(Tableau V). Car la valeur de CE50 augmente en absence d’endothélium, ce qui justifie le rôle joué par l’endothélium dans l’effet relaxant de EHA/FAT1. Tableau V : Valeurs de CE50 de relaxation de EHA/FAT1 sur la trachée avec et sans endothélium (X ± s.e.m ; n=4,*** :p<0.005) CE50 de EHA/FAT1 (mg/ml) Avec endothélium Sans endothélium 0,29 ± 0,03 0,54 ± 0,004***.