Blé dur Triticum durum

Cette étude a été menée dans le but de déterminer les changements morphologiques, physiologiques, biochimiques et enzymatiques, de deux variétés de blé dur Triticum durum, soumises à différents stress : salinité, Zinc, ainsi que leurs additions. 1. Matériels utilisés 1.1. Matériel végétale L’expérimentation est menée sur des grains de blé dur (Triticum durum Desf.). Il s’agit de deux génotypes (Sémito et GTA dur) fournis par l’OAIC (l’Office Algérien Interprofessionnel des Céréales) de la wilaya d’Annaba, nord est algérien. Classification du blé dur : Règne : Plantae Sous règne : Tracheobionta Embranchement : spermaphyte. Sous embranchement : angiosperme. Classe : monocotylédones. Ordre : poales. Sous ordre : comméliniflorales. Famille : graminaceae ou poaceae. Genre : Triticum Espèce : durum Sémito : une variété originaire d’Italie, qui se caractérise par un cycle précoce, d’une paille moyenne et d’une période de semis entre le 15 novembre et fin décembre. GTA dur : d’origine mexicaine qui a été introduite en Algérie par l’ITGC depuis l’année 2000. Le grain est de forme allongée, la paille est moyenne avec une section peu épaisse et l’épi est de couleur blanche. Cette variété présente de bonnes caractéristiques technologiques (ITGC., 2001).

Protocoles expérimentaux

La désinfection

Les graines de chaque variété ont été stérilisées pendant 30 secondes avec l’éthanol 40%, puis décontaminées avec de l’hypochlorite de sodium (7%) pendant 10 min, ensuite rincées à l’eau distillée pendant 5 min (Léguillon et al., 2003).

La culture de blé

En fonction des objectifs expérimentaux, différents systèmes de cultures ont été utilisés. Après 24 heures d’imbibition dans l’eau distillée, les graines étudiées sont mises en germination dans les boites de pétri sur la Gaz stérile humecté à 10 ml d’eau d’irrigation durant 48 heures à l’obscurité, Ensuite les graines ont été exposées à la lumière (Figure 4). La culture est mise dans des boites de pétri, ou on a provoqué un stress abiotiques en deux (02) stades différents : a. Stade de germination Le traitement se fait dès le premier jour de germination, pour une période de 9jours dans le but d’observer l’effet de différentes doses sur le taux de germination (Figure 5). b. Stade 2-3 feuilles : Les graines de blé qui ont germées, sont transplantées dans une autre boite de pétri contenant une solution nutritive (Tableau 7). L’essai est conduit dans une salle consacré à ce type d’étude La température est de 23±2°C le jour (16h) et de 20°C la nuit (8h), l’humidité est maintenue à 70% environ (Figure 6). Le traitement se fait après que les plantules atteignent le stade 2-3 feuilles dans les boites de pétri (Figure 5), pour une période de 3, 6 et 9 jours à différentes doses. Pour ce stade, l’irrigation des plantules se fait comme suite : – 1 ere semaine : irrigation à l’eau distillée – Après 1ere semaine : irrigation avec solution nutritive – Le jour du traitement : addition des différentes doses de traitement a la solution nutritive. La récolte a été faite à des périodes différentes d’exposition au stress (3, 6, 9 jours). Les tests ont été effectués au même stade de développement des plantules. Pour éliminer autant que possible les multiples sources de contaminations, nous avons pris les précautions suivantes : – désinfecter le plan de germination avec l’eau de javel à 20% chaque jour. – Stériliser les milieux d’irrigation dans le stérilisateur. 1.3 Le protocole d’application des stress Les doses utilisées pour le traitement salin ainsi que celui du Zinc ont été choisies parmi une batterie de doses testées préalablement (Figure 7). 41 Figure 4. Protocole expérimentale de germination Blé dur Imbibition 24H Germination boite de petri Chambre de culture Stade germinataion Stade 2-3 feuilles Doses de traitement : Solution nutritive Stérilisateur Solution nutritive stérile  Préparation des grains 2- Préparation des solutions d’irrigation Témoin Dose 1 Dose 2 Dose 3 Dose 4 NaCl 25 mM 50 mM 75 mM 100 mM ZnSO4 0.12 mM 0.25 mM 0.5 mM 1 mM 42 Stade germination Stade 2-3 feuilles Figure 5. Stades de traitements des plantules de blé dur 43 Figure 6. Serre semi conditionnée 44 Tableau 7. Préparation solution nutritive A- Solutions de base Macro-elements de Murashige et Skoog (1962) (Solution 1) Concentration en g en 1,5 L d’eau distillée NH4NO3 KNO3 CaCl2, 2 H2O MgSO4, 7 H2O KH2PO4 20,62 23,75 5,5 4,62 2,12 Micro-elements de Murashige et Skoog (1962) (Solution 2) Concentration en mg en 1L d’eau distillé H3BO3 MnSO4, 4H2O ZnSO4, 4H2O KI Na2MoO4, 2H2O CuSO4, 5H2O CoCL2, 6H2O 620 2230 86 83 25 2,5 2,5 Fe.EDTA d’apres Lin et Staba (1961) (Solution 3) Concentration en mg/100 ml d’eau distillée Na2EDTA FeSO4, 7 H2O 74 55,7 B- Milieu de culture Solution 1 macroéléments Solution 2 microéléments Solution 3 Fe-EDTA .