ÉTUDE DE L’ACTIVITÉ DE L’EXTRAIT Fk02 Sur
L’HYPERGLYCÉMIE CHEZ LA SOURIS

PARTIE PHARMACOLOGIQUE

 L’activité de l’extrait Fk02 a été étudiée sur l’hyperglycémie expérimentale chez la souris. Deux méthodes ont été utilisées pour la provoquer: une surcharge glucosée pour provoquer une hyperglycémie transitoire, et une surcharge de graisse pour déclencher une hyperglycémie chronique. 

Animaux d’expérimentation 

Des souris de race SWISS des deux sexes, âgées de 3 à 4 mois et pesant entre 19 et 21 g ont été utilisées. Elles ont été élevées à l’animalerie du Laboratoire de Pharmacologie Générale, de Pharmacocinétique et de Cosmétologie (Faculté des Sciences, Université d’Antananarivo), avec une alternance de lumière et d’obscurité de 12 heures/ 12 heures et à la température ambiante. Ces animaux ont été privés de nourriture pendant 16 heures avant chaque test, mais ils ont eu accès à de l’eau à volonté. Leur glycémie a été mesurée avec un glucomètre après un prélèvement sanguin. 

Technique de prélèvement sanguin et de mesure de la glycémie

 Une saignée a été effectuée en piquant la veine maxillaire de l’animal avec une aiguille, puis la goutte de sang qui en coulait a été recueillie sur une bandelette réactive fournie avec le glucomètre « On Call Plus © » (Figure 3). Figure 3. Photographie d’un glucomètre.

 Préparation des produits 

Trois solutions ont été utilisées dans ce travail: une solution de glucose préparée en dissolvant 8 mg/ml de glucose dans de l’eau distillée et deux solutions contenant l’extrait préparées en le dissolvant dans l’eau distillée, l’une avec une concentration de 0,4 mg/ml et l’autre à 1,2 mg/ml. 9 Ces trois solutions ont été administrées par voie orale dans un volume de 10 ml, pour obtenir 4 g/kg de glucose, puis 200 et 600 mg/kg d’extrait par administration.

 Etude de l’effet de Fk02 sur l’hyperglycémie transitoire chez les souris engraissées 

Les souris rendues expérimentalement hyperglycémiques par les 21 jours de régime hyperlipidique ont été utilisées. Les animaux ont reçu l’extrait aux doses de 200 et 600 mg/kg par voie orale. Trente minutes après l’administration de l’extrait, ils ont reçu 4 g/kg de la solution de glucose. Leur glycémie a été mesurée juste après l’administration de la solution de glucose T0 puis, après 30, 60 et 90 minutes (LEMHADRI A et coll., 2007). 5. Etude de l’effet de Fk02 sur l’hyperglycémie chronique L’obésité est un des facteurs qui favorise l’hyperglycémie chronique. L’effet de Fk02 sur l’hyperglycémie chronique a été étudié sur des souris rendues obèses expérimentalement. Elles ont été soumises à un régime enrichi en lipide, composé de 2 g de saindoux mélangés avec 5 g de provende (LFL n° 14/20 croissance porc) pendant 21 jours (LEMHADRI A et coll., 2007). Ces animaux ont été pesés le 1er, 5, 10, 15 et 21ème jour et en même temps, leur glycémie a été mesurée. Après cette période d’engraissement, les animaux dont la masse a été supérieur à 29 g et la glycémie supérieure à 6,8 mmol/l ont été retenus pour les tests. a. Etude de l’effet de Fk02 sur le poids des souris engraissées Les souris engraissées sélectionnés ont été réparties en 3 lots, un lot témoin, et deux lots traités avec l’extrait Fk02. Pendant 7 jours, les animaux du lot témoin ont reçu 10 ml/kg d’eau distillée, et les animaux des 2 autres lots ont reçu l’extrait aux doses de 200 et 600 mg/kg. Ces animaux ont été pesés aux 1 er, 3, 5 et 7ème jour de traitement pour suivre la variation de leur poids (LEMHADRI A et coll., 2007). b. Etude de l’effet de Fk02 sur la glycémie des souris engraissées Après la période d’engraissement, les souris ont été réparties en 3 lots, 1 lot témoin ayant reçu 10 ml/kg d’eau distillée, et 2 lots traités avec l’extrait aux doses respectives de 200 et 600 mg/kg. La glycémie de ces animaux a été mesurée tous les matins à jeun, aux 1 er, 3, 5 et 7ème jour de traitement pour étudier l’effet de l’extrait sur l’hyperglycémie chronique provoquée par l’obésité (LEMHADRI A et coll., 2007)

DISCUSSION

Ce travail a eu pour objectif d’étudier l’activité de l’extrait Fk02 sur l’hyperglycémie provoquée expérimentalement chez la souris. Ces dernières ont été rendues hyperglycémiques en les soumettant à un régime enrichi en lipide ou en administrant une surcharge glucosée par voie orale. Les résultats des tests que nous avions effectués montrent qu’un régime hyperlipidique augmente la masse et la glycémie des souris, et l’administration quotidienne de l’extrait Fk02 par voie orale les diminue. La corrélation entre une alimentation riche en lipide et le diabète de type 2 est bien établie. En effet, ce genre de régime entraine un surpoids, et contribue au développement de la résistance à l’insuline suite à l’augmentation de substrats lipidiques mis en circulation et leur entrée dans les tissus, entrainant ainsi l’hyperglycémie chronique (SHERWOOD L. et coll., 2013 ; BATTU C. 2014). Nous avons observé que la glycémie des animaux traités avec l’extrait ainsi que leur masse avaient diminué. Cette diminution pourrait être expliquée par une augmentation de la sensibilité des récepteurs de l’insuline grâce à la présence des alcaloïdes dans l’extrait (FRIEDMAN J.E. et coll., 1992 ; BAVENHOLM P.M. et coll., 2001). Comme c’est le cas des alcaloïdes extraits de Tinospora cordifolia (MENISPERMACEAE) (PATEL M.B. et MISHRA S., 2012) et les alcaloïdes isolés de Galega officinalis (FABACEAE) où à partir duquel, la metformine (Glucophage®) a été obtenue (SCHEEN A.J., 2015). Il se peut aussi que l’extrait Fk02 agit de la même façon que l’insuline en augmentant l’intégration de glucose dans les tissus cibles (CHEATHAM B. et KAHN C.R., 1995). Ce cas est observé avec les triterpènes et les stéroïdes dans les feuilles de Momordica charantia (CUCURBITACEAE) (MARLES R.J. et FARNSWORTH N.R., 1994). Les résultats du criblage phytochimique effectué sur l’extrait Fk02 révèlent la présence de ces familles chimiques, ce qui nous permet de proposer que ces dernières pourraient reproduire l’action de l’insuline, offrant ainsi à la cellule une meilleure utilisation de glucose, diminuant ainsi la glycémie. En plus, les stéroïdes augmentent l’utilisation hépatique de glucose en augmentant le taux de transporteurs membranaires de glucose et en inhibant la néoglucogenèse, comme dans le cas de Momordica chanrantia (CUCURBITACEAE) (MARLES R.J. et FARNSWORTH N.R., 1994 ; ACHI-AL A., 2005). D’autre part, l’extrait Fk02 diminue l’hyperglycémie provoquée par une surcharge glucosée. On peut avancer une autre hypothèse, que l’extrait augmenterait l’utilisation périphérique du 16 glucose en l’utilisant comme source d’énergie ou inhiberait leur absorption au niveau de l’intestin (YASODHA K.J. et coll., 2008). Cette hypothèse a été basée sur des études portant sur les polysaccharides isolés à partir de Salicornia herbacea (AMARANTHACEAE) (KIM SH. et coll., 2008) et celui de la feuille de Ziziphus mauritiana (RHAMNACEAE) (DIALLO D. et coll., 2004) qui sont responsables de l’activité antihyperglycémique de ces plantes. Ces polysaccharides forment des mucilages qui inhibent l’α-glucosidase et ralentissent la résorption des sucres. Ils augmentent également la capture du glucose par les tissus périphériques en offrant une meilleure utilisation. Puisque l’extrait Fk02 contient des polysaccharides, on peut supposer que son activité antihyperglycémiante pourrait être due à la présence de cette famille chimique. L’ensemble de ces résultats nous permet de dire que l’intolérance au glucose chez les souris rendues obèses diminue après traitement journalier avec l’extrait Fk02. Cet effet pourrait être due à l’augmentation de la sensibilité des récepteurs de l’insuline, afin d’utiliser le glucose, car le poids des animaux traités avec l’extrait a diminué avec le traitement (FRIEDMAN J.E. et coll., 1992 ; YASODHA K.J. et coll., 2008 ; BAVENHOLM P.M. et coll., 2001). Ce travail est une première approche et est peu indicatif sur le mécanisme réel par lequel agit l’extrait pour diminuer l’hyperglycémie. Une étude approfondie visant les sites d’action est nécessaire pour la suite