Reproduction de la palourde Ruditapes decussatus

La palourde Ruditapes decussatus (L.), de la famille des Veneridae, est présente en mer du Nord et dans le nord-est atlantique, depuis les côtes norvégiennes jusqu’aux Açores et aux côtes sénégalaises. Elle est commune dans les zones estuariennes et lagunaires de la majeure partie du bassin méditerranéen (Parache, 1982 ; Lubet, 1984). On la rencontre dans des sables, des graviers envasés ou des vases au dessous du niveau de mi-marée (Tebble, 1966). En Tunisie elle est présente sur presque tout le littoral, en particulier dans le golfe de Gabès (Medhioub, 1983). Dans ce pays, R. decussatus représente un enjeu économique important, tant au niveau de l’emploi que de la balance commerciale du pays via son exportation vers l’Europe

En conchyliculture, le conditionnement des reproducteurs est l’une des phases clés de la réussite de la production larvaire et la connaissance préalable du déroulement du cycle sexuel dans la nature est indispensable pour maîtriser cette étape. Plusieurs études sur le cycle de reproduction de R. decussatus en milieu naturel ont été réalisées dans différents pays dont la Tunisie (Zamouri-Langar, 1991 ; Trigui-El Menif et al., 1995), le Maroc (Shafee & Daouadi, 1991), la France (Gallois, 1977 ; Beninger & Lucas, 1984 ; Laruelle et al., 1994 ; Laruelle, 1999), l’Espagne (Rodriguez-Moscoso & Arnaiz, 1998), l’Irlande (Xie & Burnell, 1994), et l’Italie (Breber, 1980). Par contre, en milieu contrôlé, la dynamique de la gamétogenèse a été décrite, notamment chez Crassostrea gigas (Lubet, 1976 ; Lubet et Mathieu, 1999 ; LangoReynoso et al., 2000 ; Chàvez-Villalba, 2001 ; Chàvez-Villalba et al., 2002a,b) et R. philippinarum ( Mann, 1979a ; Toba & Miyama, 1991 ; Zine et al., 1998) ; chez R. decussatus aucune étude de ce type n’a été réalisée. Toutfois, Mann, 1979a ; Toba et Miyama, 1991 et Zine et al., 1998 ont étudié le cycle sexuel de R. philippinarum en milieu contrôlé mais aucune étude en relation avec le milieu naturel n’a été réalisée, pourtant cette liaison est essentielle à la compréhension de la gamétogenèse pendant le conditionnement. C’est la raison pour laquelle nous nous sommes intéressés à étudier dans un premier temps le déroulement de la gamétogenèse chez R. decussatus, indigène de la Tunisie, en milieu contrôlé, en relation avec son cycle naturel afin de mieux comprendre sa dynamique et mieux maîtriser son élevage.

Au cours de la précédente décennie, la Tunisie s’est ouverte sur l’aquaculture proposant un schéma de développement et d’aménagement de cette économie de la mer pour l’ensemble du littoral. Parmi les espèces cibles retenues pour ce pays, le vénéridé R. decussatus, constitue l’enjeu économique le plus important en conchyliculture. Deux approches sont suivies pour développer la vénériculture : la préservation de cette ressource grâce à la mise en place de mesures de gestion des pêches et, en parallèle, le repeuplement du milieu à partir de naissains produits en écloserie. Ceci sous-entend un développement optimal des techniques de production en écloserie et une maîtrise de l’élevage sur le terrain, comme cela s’est fait en France pour l’espèce indo-pacifique Ruditapes philippinarum et depuis quelques années au Chili, pour un autre vénéridé Venus antigua (Bustos & Olavarria, 2000). En écloserie, l’obtention des gamètes de bivalves devant conduire à des élevages larvaires se fait, en routine, notamment par application de la méthode des chocs thermiques (Loosanoff & Davis, 1963). Celle-ci a fait ses preuves chez plusieurs bivalves d’intérêt aquacole (Le Pennec, 1987). Nous proposons, dans une partie de notre étude (chapitre 2), une méthode alternative aux chocs thermiques qui nous permette d’obtenir plus facilement et plus rapidement des gamètes, par dissection de la gonade. Cette méthode fait intervenir l’inducteur chimique : la sérotonine (5-HT) qui permet aux ovocytes d’atteindre le stade de maturité et être prêts à la fécondation. De même, nous proposons d’étudier d’autres approches permettant de caractériser l’état de maturité ovocytaire chez R. decussatus en conditionnement et d’évaluer l’aptitude des ovocytes à être fécondés en se basant sur la sérotonine.

Par ailleurs, nous savons que la reproduction des mollusques bivalves est fortement influencée par les facteurs abiotiques et biotiques de l’environnement (température, salinité, polluants, agents pathogènes, ressources trophiques …) (Loosanoff & Davis, 1963 ; Sastry, 1968 ; Mann, 1979 a,b) qui modulent fortement leur système immunitaire (Feng, 1965 ; Fisher et Newell, 1986 ; Fisher,1988 ; Fisher et al., 1989 et 1996 ; Oubella et al., 1996). Ainsi, pour approfondir nos connaissances, nous avons recherché si des variations des paramètres cellulaires et biochimiques de l’hémolymphe pouvaient être associées à des changements physiologiques liés à la reproduction. Pour cela, un suivi des paramètres immunitaires : cellulaires et humoraux, au sein de l’hémolymphe a été réalisé en parallèle à celui de la reproduction en milieu naturel et en milieu contrôlé sur les mêmes individus. Cette étude tentera aussi d’établir de nouveaux critères de maturation ovocytaires en se basant sur les paramètres immunitaires.

Une étude comparative du cycle de gamétogenèse de R. decussatus a été réalisée en milieu naturel sur une année et en milieu contrôlé sur deux périodes de l’année, lors de deux conditionnements hivernaux et d’un conditionnement estival. La description du cycle de gamétogenèse a été réalisée à l’aide des méthodes qualitatives par analyse histologique et semi-quantitatives par suivi de l’indice de condition et l’analyse d’images. Ces méthodes consistent en l’utilisation d’indices traduisant les variations de la condition, l’effort de reproduction et les émissions gamétiques et l’application d’une échelle de maturité. Il s’agit d’approches complémentaires et indispensables dont les résultats, plus ou moins détaillés suivant la méthode, sont convergents.

La population naturelle choisie est située à Oued Maltine (région de Sfax, sud tunisien) (Fig. 1). Le cycle de reproduction a été étudié pendant l’année 2001 et au début de 2002. Les prélèvements de 100 à 150 individus de 30 à 46 mm (de longueur de coquille) ont été mensuels de janvier à mai et bimensuels de juin à décembre, suivis de deux prélèvements mensuels en janvier et février 2002 .

Le conditionnement des géniteurs originaire de l’Oued Maltine (150 individus de 30 à 46 mm) a été effectué du :

➤ 15 janvier au 15 mai pour 2001 (conditionnement hiver – printemps)
➤ 06 février au 07 mai pour 2002 (conditionnement hiver – printemps)
➤ 10 juillet au 25 octobre pour 2001 (conditionnement été – automne).

Table des matières

INTRODUCTION
CHAPITRE 1 : ÉTUDE COMPARATIVE DU CYCLE DE REPRODUCTION DE LA PALOURDE RUDITAPES DECUSSATUS EN MILIEU NATUREL (SUD TUNISIE) ET EN MILIEU CONTRÔLÉ (ÉCLOSERIE)
1.1. Introduction
1.2. Matériels et méthodes
1.2.1. Matériels biologiques et conditions d’élevages
1.2.2. Paramètres étudiés
1.2.3. Analyses statistiques
1.3. Résultats
1.3.1. Cycle de reproduction en milieu naturel
1.3.1.1. Indice de condition
1.3.1.2. Évolution du diamètre ovocytaire moyen
1.3.1.3. Distribution de fréquence des diamètres ovocytaires
1.3.1.4. Évolution des stades reproductifs
1.3.2. Cycle de reproduction en milieu contrôlé
1.3.2.1. Indice de condition
1.3.2.2. Évolution du diamètre ovocytaire moyen
1.3.2.3. Distribution des fréquences des diamètres ovocytaires
1.3.2.4. Évolution des stades reproductifs
1.4. Discussion et conclusion
CHAPITRE 2 : ÉVALUATION DE LA COMPÉTENCE DES OVOCYTES À LA FÉCONDATION PAR LA SÉROTONINE (5-HT)
2.1. Introduction
2.2. Matériels et méthodes
2.2.1. Conditions expérimentales
2.2.2. Méthodes utilisées
2.2.2.1. Obtention des gamètes
2.2.2.2. Tests d’induction à la GVBD
2.2.2.3. Tests de fécondation
2.3. Résultats
2.3.1. Induction à la GVBD
2.3.1.1. Effet de la sérotonine
2.3.1.2. Effet du temps
2.3.2. Tests de fécondation
2.4. Discussion et conclusion
CHAPITRE 3 : ÉVALUATION DES PARAMÈTRES IMMUNITAIRES DE R. DECUSSATUS IN SITU ET EN CONDITIONNEMENT : RELATION AVEC SON CYCLE SEXUEL.
3. 1. Introduction
3.2. Matériels et méthodes
3.2.1. Matériels biologiques et conditions d’élevages
3.2.2. Paramètres étudiés
3.2.2.1. Étude du cycle de reproduction
3.2.2.2. Diagnostic du système immunitaire
a. Prélèvement de l’hémolymphe
b. Choix du fixateur
c. Concentration hémocytaire totale (CHT) et différentielle (CHD)
d. Dosage des protéines sériques
e. Mesure de l’activité de la phosphatase acide dans le sérum
3.2.3. Analyses statistiques
3.3. Résultats
3.3.1. Paramètres immunitaires en milieu naturel
3.3.1.1. Paramètres cellulaires
3.3.2. Paramètres immunitaires en milieu contrôlé : hiver 2002
3.3.2.1. Paramètres cellulaires
3.3.2.2. Paramètres biochimiques
3.3.2.3. Relation entre paramètres immunitaires et paramètre de suivi du cycle sexuel
3.3.3. Paramètres immunitaires en milieu contrôlé : été 2002
3.3.3.1. Paramètres cellulaires
3.3.3.2. Paramètres biochimiques
3.3.3.3. Relation entre paramètres immunitaires et paramètres de suivi du cycle sexuel
3.4. Discussion
3.5. Conclusion
CONCLUSION GÉNÉRALE

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