Méthodes de séparation, d’identification et de quantification

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Utilisations en médecine traditionnelle

La plupart des parties de Z. leprieurii sont très aromatiques et couramment utilisées en médecine traditionnelle. Des décoctions d’écorce de tige ou d’écorce de racine sont généralement prises comme diurétique et purgatif pour traiter des maladies vénériennes, la stérilité, les douleurs rénales, les douleurs du bas du dos, les douleurs post-partum, l’arthrose, les infections cutanées et urinaires, la dysenterie, les vers intestinaux et les douleurs abdominales. De l’écorce de tige ou des jeunes pousses ou feuilles transformées en pate sont également appliquées de façon topique pour traiter des blessures, des plaies syphilitiques, les ulcères lépreux, les maux de dents et saignement des gencives [37]. Par ailleurs, ces pratiques traditionnelles diffèrent selon les pays en Afrique. Au Sénégal, la poudre d’écorce avec le latex de Baissea axillaris (Benth) est appliquée sur les tumeurs. Au Libéria, les feuilles sont ajoutées à un bouillon de riz pour fortifier les nourrissons. Au Cameroun, l’infusion de fruits se prend pour traiter l’anémie falciforme, mais aussi on utilise les fruits séchés comme épices dans des soupes locales appelées « nkui » et « nah-poh ». En RD Congo, la macération de l’extrait d’écorce de tige est appliquée sur la tête pour tuer les poux. Au Nigéria, on jette dans l’eau des racines écrasées pour étourdir les poissons. Les racines et les écorces du tronc de Z. leprieurii sont des poisons pour certaines espèces de souris, puce, poisson, et paramécie. Ces racines sont par conséquent utilisées comme vermifuge, fébrifuge et pesticide. Par ailleurs, elles sont très utilisées sous forme de bâton à mâcher servant à nettoyer la bouche [2].

Composition chimique des huiles essentielles

A notre connaissance, la composition chimique des huiles essentielles de Z. leprieurii a fait seulement l’objet de neuf études, elles concernent sept huiles essentielles de fruits, quatre de feuilles et une de tiges. Toutes les études ont été réalisées dans deux pays, le Cameroun (7) et le Nigeria (2). Cette composition chimique présente une variabilité chimique aussi bien qualitative que quantitative. La composition chimique de l’huile essentielle des fruits a été rapportée pour la première par Reisch et al. (1985) au Nigeria. Elle était dominée par l’-pinène (43,1%), le-farnésène (4,9%), l’humulène (1,3%) et le-Cadinène (2%) [38]. Par contre, celle des feuilles étudiée par Ekundayo et al. (1986) était constituée par le-pinène (22,9%), le caryophylléol (24,6%) et le caryophyllène (13,6%) [39].
Au Cameroun, six études ont été réalisées sur la composition chimique des huiles essentielles de fruits. Ainsi, en 1989, Lamaty et al. ont rapporté une composition riche en monoterpènes hydrocarbonés avec le (E)--ocimène (44%), le terpinolène (26%) et le-3-carène (14,5%) comme composés majoritaires [40]. Les travaux successifs ont mis en évidence une dominance de (E)--ocimène dans les huiles essentielles de fruits :
– (E)--ocimène (42.9%), α-terpinolène (9.3%), δ-3-carène (6.5%), limonène (5.5%), myrcène (4.7%), α-pinène (3.9%) et p-cymène (3.3%) [41]; – (E)--ocimène (80,7%) [42]; – (E)--ocimène (29,4%), myrcène (28,6%), limonène (13,6%) and α-pinène (8,1%) [43]; – (E)--ocimène (77,4%) .
Cependant, ces compositions chimiques diffèrent fortement de celle rapportée par Gardini et al. (2009) dans les huiles essentielles de fruits en provenance du Cameroun. Elle était principalement constituée de composés oxygénés comme le-citronellol (17,4%), l’acide citronéllique (16%),-citronellal (6,51%) et le 2,6-dimethyl-2,6-octadiène (11,4%) [45]. La composition chimique de l’huile essentielle des feuilles en provenance du Cameroun a été rapportée dans trois études et trois chémotypes ont été définis :
– terpinolène (49,8%), δ-3-carène (17,9%) et acétate de géranyle (8,5%) [40];
– limonène (94, 9%) [6];
– (E)--ocimène, myrcène et thujanol [42].
La composition chimique de l’huile essentielle des tiges a été décrite une seule fois dans la littérature par Oyedej et al. (2007). Elle était dominée par des sesquiterpenes avec le (E)-nérolidol (23%), l’humuénol (17,5%), l’elemol (5,7%) et l’humulène (3,3%) comme composés majoritaires [6].

Activités biologiques

L’évaluation des activités biologiques de l’huile essentielle de Z. leprieurii a fait l’objet de quelques études. Elles possèdent des activités antimicrobiennes, antiinflammatoires ainsi que des activités anti-oxydantes. En 2003, Tatsadjieu et al. ont évalué pour la première fois l’activité antibactérienne de l’huile essentielle des fruits de Z. leprieurii qui était principalement constituée par des monoterpènes hydrocarbonés comme le trans--ocimène (42,9%), l’-terpinolène (9,3%), le 3--carène (6,5%), le limonène(5,5%), le myrcène (4,7%) et l’-pinène (3,9%) sur les souches Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Enterococcus faecalis, Corynebacterium glutamicum, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Aspergillus flavus. Il ressort une activité modérée de l’huile essentielle contre ces souches [41]. Par ailleurs, Gardini et al. (2009) ont mesuré une activité modérée de l’huile essentielle des fruits (-citronellol (17,4%), l’acide citronéllique (16%),-citronellal (6,51%) et le 2,6-dimethyl-2,6-octadiène (11,4%)) contre Listeria monocytogenes, Salmonella enteritidis, Staphylococcus aureus . Cependant, Misra et al. (2013) ont mesuré une très faible activité contre les souches testées car l’huile essentielle des fruits était principalement constituée par le (E)--ocimène [44]. Dongmo et al. (2008) ont mis en évidence une activité antiinflammatoire et antioxydante de l’huile essentielle des fruits qui était principalement constituée par le (E)--ocimène (80,7%) [42].

Matériel et méthodes

Cadre d’étude

Cette étude a été réalisée au sein du Laboratoire de Chimie Organique et Thérapeutique de la Faculté de Médecine, de Pharmacie et d’Odontologie de l’université Cheikh Anta Diop de Dakar et du Laboratoire de Chimie des Produits naturels de l’Université de Corse (France).

Echantillonnage

Les fruits ont été récoltés en fin octobre 2015 à Colomba dans le département de Bignona (Ziguinchor-Sénégal).

Préparation de l’huile essentielle

Le matériel végétal a été séché pendant quelques jours à la température ambiante du laboratoire. Ensuite, il a été hydrodistillé pendant 5 heures à l’aide d’un appareil de type Clevenger selon la méthode recommandée par la pharmacopée européenne [20]. L’huile essentielle a été conservée dans des flacons de verre ambré à une température de 4°C.

Méthodologie d’analyse du laboratoire

Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG)

Les analyses ont été réalisées à l’aide d’un chromatographe Perkin Elmer Autosystem GC, équipé de deux détecteurs à ionisation de flamme (DIF) permettant la détection des composés, d’un injecteur diviseur et de deux colonnes (60 m × 0.22mm d.i ; épaisseur du film : 0,25µm) respectivement polaire (Rtx-Wax, polyéthylène glycol) et apolaire (Rtx-1, polydiméthyl-siloxane). Pour chacun des composés, les indices de rétention polaires et apolaires sont calculés à partir des temps de rétention d’une gamme d’étalon d’alcanes de C5 à C30. Le gaz vecteur est l’hydrogène (1ml/mn) avec une pression en tête de colonne de 25 psi. La température de l’injecteur est de 250°C. La programmation de la température

Table des matières

INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE : REVUE BIBLIOGRAPHIQUE
I. Huiles essentielles
I.1. Présentation
I.2. Intérêt thérapeutique, écologique et économique
I.3. Toxicité
I.4. Méthodes d’analyse
I.4.1. Méthodes de préparation
I.4.2. Méthodes de séparation, d’identification et de quantification
II. Zanthoxylum leprieurii
II.1. Botanique
II.1.1. Classification botanique.
II.1.2. Habitat et distribution géographique
II.2. Utilisations en médecine traditionnelle
II.3. Composition chimique des huiles essentielles
II.4. Activités biologiques
DEUXIEME PARTIE : TRAVAIL EXPERIMENTAL
I. Matériel et méthodes
I.1. Cadre d’étude
I.2. Echantillonnage
I.3. Préparation de l’huile essentielle
I.4. Méthodologie d’analyse du laboratoire
I.4.1. Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG)
I.4.2. Chromatographie en Phase Gazeuse/Spectrométrie de Masse (CPG/SM)
I.4.3. Identification des constituants
II. Résultats et discussion
II.1. Rendement
II.2. Composition chimique
CONCLUSION
REFERENCES

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