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Infestation expérimentale des animaux
L’innoculation à faible quantité d’ookystes a été réalisée dans le but de provoquer la coccidiose subclinique afin d’éviter la mortalité brutale des animaux pendant la durée de l’expérimentation .Ce qui nous a permis de suivre l’efficacité d’anticoccidien et des extraits de la plante que nous avons étudiés.
Technique d’évaluation de l’opg
L’analyse quantitative a été utilisée pour la numération des coccidies par la méthode de MAC MASTER à cause de sa simplicité et de sa rapidité dans l’appréciation de l’efficacité des produits utilisés pour le traitement.
Résultats
Les fractions butanolique, d’acétate d’éthyle et totale sont actives sur les ookystes de coccidies. En effet , 12 jours après le traitement, les ookystes de coccidies avaient complètement disparu. Ces résultats s’accordent avec l’utilisation des racines de cassia sieberiana comme antiparasitaire (1,26,16). Lors de l’évaluation de l’activité anticoccidienne d’une plante de la flore camerounaise à savoir : Cylicodiscus gabunensis, ESSOMBA (11) a montré qu’avec une concentration de 15g/l à une dose de 0,2ml , les poulets du lot ayant reçu l’extrait ethanolique ,avaient vu le nombre de leurs ookystes de coccidies diminuer considérablement . Comparé à nos travaux , nous pouvons dire que les racines de casssia sieberiana possèdent une réelle activité anticoccidien. L’efficacité des médicaments utilisés pour le traitement des coccidioses est de plus en plus contestée . En effet, d’après les travaux de ESSOMBA(11), les lots qui ont reçu l’amprolium à 20% ont un nombre d’ookystes de coccidies par gramme de fèces variable . Ce qui l’amène à dire que le germe est plus pathogène quand il est transmis naturellement aux animaux et que l’efficacité de l’amprolium était mise en question. Il est nécessaire de trouver de nouveaux chefs de file dans cette direction . A ce titre l’extraction bioguidée des racines de cassia sieberiana pourrait conduire à des substances intéressantes. L’extrait butanolique a donné les meilleurs résultats sur les ookystes de coccidies. En effet comparé à l’extrait d’acétate d’éthyle, pour une même concentration de 18mg/ml, L’efficacité thérapeutique du lot traité avec ce dernier est de 50% au 9eme jour alors qu’elle est de 85% pour le lot traité avec l’extrait butanolique à ce même jour.
CONCLUSION
Cassia sieberiana, appelé « senden » ou « sendjen »en wolof et cassé du Sénégal ou Cassia de sieber en français est une plante appartenant à la famille des CAESELPINIACEAE. Elle est très connue au Sénégal du fait de ses multiples vertus thérapeutiques. Du point de vue botanique, nous retenons que c’est un petit arbre de 8 à 10 mètre, caractérisée par des branches flexueuses et tombantes. Ses feuilles sont composées paripennées, opposées alternes et les fruits sont de longues gousses noirâtres pouvant atteindre jusqu’à 60 cm de long. Les racines constituent la partie de la plante la plus utilisée en médecine traditionnelle ceci étant du en grande partie des nombreuses vertus thérapeutiques qu’on leurs attribue .En effet, elles sont réputées être actives dans de nombreuses affections telles que les parasitoses intestinales. En tenant compte de ces considérations éthnopharmacologiques, nous nous sommes intéressés à l’étude de la plante sous l’angle chimique et pharmacologique. Ainsi après avoir fait une synthèse bibliographique se rapportant à la plante, nous avons ensuite étudié de manière qualitative les dérivés anthracèniques présentes dans les racines de la plante avant de faire un fractionnement de l’extrait total avec des solvants polaires à savoir : l’acétate d’éthyle et le butanol, ce qui nous a permis d’étudier l’effet des fractions obtenues sur les coccidies. Pour 250g de poudre de racines extraite au soxhlet avec 1 litre d’éthanol à 90° pendant 9h, nous avons obtenu 43g soit un taux d’extraction de 17%. Par rapport à la prise d’essai de ces 43g, les extraits d’acétate d’éthyle et butanolique ont donné respectivement les pourcentages d’extraction de : 23,26% et de 9,30%. La caractérisation des dérivés anthracèniques dans l’extrait total avec l’acétate de magnésium donne une coloration rouge attestant la présence de ceux-ci. Tandis que , la rheine , de même que le chrysophanol ont pu être caractérisé par C.C.M. de l’extrait total. L’étude de l’activité anticoccidien de l’extrait total, des fractions d’acétate d’éthyle, butanolique et acqueuse résiduelle a été réalisée sur des lapins qui ont été parasités subcliniquement et répartis au hasard en 6 lots comprenant chacun
5. Pour cela, le schéma de traitement suivant a été adopté :
– Le lot 1 a été traité avec l’extrait acqueux résiduel à 18,6mg /ml à la dose de 0,2ml/lapin pendant 2 jours.
– Le lot 2 a reçu par voie orale l’extrait butanolique à 18mg/ml à la dose de 0,2ml/mg/lapin pendant 2 jours.
– Le lot 3 a reçu quant à lui l’extrait d’acétate d’éthyle à 18mg/ml à la même dose que les précédents.
– Le lot 4 a reçu l’extrait total à 200mg/ml Selon la même posologie que les précédents.
– Le lot 5 a été traité avec du sulfamide à 0,2g/l/animal pendant 3 jours .
– Le lot 6 nous a servi de témoin.
Un suivi parasitologie été effectué pendant 30 jours, nous a montré des efficacités thérapeutiques de 50% pour le lot 3 et 85% pour le lot 2, ceci au 9eme jour après traitement. A partir du 12eme jour, les lots 2, 3 et 4 voient disparaître toutes leurs ookystes de coccidies alors que les lots 1, 5, et 6 présentent toujours des oookystes de coccidies qui ont tendance à augmenter au niveau des lots 1 et 6 et de diminuer pour le lot 5.
Table des matières
INTRODUCTION
CHAPITRE I : ETUDE BIBLIOGRAPHIQUE
I / DESCRIPTION BOTANIQUE ET REPARTITION GEOGRAPHIQUE DE CASSIA SIEBERIANA
I.1 RAPPEL BOTANIQUE
I .1.1 Position systématique
I.1.2 Noms en langues nationales
I.1.3 Description botanique et répartition géographique
II / COMPOSITION CHIMIQUE
III / TRAVAUX SUR LA PHARMACOLOGIE
III-1 Emplois traditionnels de Cassia sieberiana
III-2 Pharmacologie
IV/ SYSTEMATIQUE ET RAPPEL SUR LES COCCIDIOSES DES LEPORIDES
IV-1/ Position systématique
IV-2/Rappel sur les coccidioses des léporidés
IV-2-1 Caractères généraux
IV-2-1-1 Coccidiose hépatique
IV-2-1-2 Coccidioses intestinales
IV-2-1-3 Traitement et prophylaxie
V/ REVUE DES PROCEDES D’ANALYSE BIOCHIMIQUE
V-1 / Les procédés d’extraction
V-1-1 Extraction solide-liquide
V-1-2 Extraction liquide-liquide
V-1-3 Entraînement à la vapeur d’eau
V-2 / Techniques d’analyse et de séparation
V-2-1 La séparation par précipitation ou rupture de phase
V-2-2 Le fractionnement par solvant (extraction sélective)
V-2-3 La chromatographie
V-2-3-1 Historique et principe
V-2-3-2 Les méthodes chromatographiques
CHAPITRE II : ETUDE EXPERIENTALE
I / MATERIELS ET METHODES
I-1 Matériels et réactifs
I-1-1 Matériel végétal
I-1-2 Matériel animal
I-1-3 Autres matériels et réactifs utilisés
I-1-3-1 Matériel et réactifs utilisés pour l’extraction
I-1-3-2 Matériel et réactifs utilisés pour les caractérisation générale et spécifique des dérivés anthracéniques
I-1-3-4 Etudes pharmacologiques
I-2 Méthodes d’études
I-2-1 Extraction
I-2-2 Caractérisations générale et spécifique des anthracènosides de l’extrait total
I-2-2-1 Extraction des génines anthracéniques de l’extrait total après hydrolyse
I-2-2-2 Caractérisation générale des génines anthracéniques de l’extrait total
I-2-2-3 Obtention des génines rhéiniques
I-2-2-4 Caractérisation spécifique par chromatographie sur couche mince (C.C.M.) génines anthracéniques de l’extrait total
I-2-3 Essais pharmacologiques : étude de l’activité antiparasitaire
I-2-3-1 Protocole expérimental
I-2-3-1-1 Infestation artificielle des lapins
I-2-3-1-2 Sporulation des ookystes
I-2-3-1-3 Inoculation
I-2-3-1-4 Examen des matières fécales ou coprologie
I-2-3-1-4-1 Collecte des matières fécales
I-2-3-1-4-2 Coprologie qualitative
I-2-3-1-4-2-1 Examen après enrichissement par flottation
I-2-3-1-4-3 Coprologie quantitative
II/ RESULTATS
II-1 Rendements de l’extraction et du fractionnement
II-2 Caractérisations générale et spécifique des anthracènnosides de l’extrait total
II-2-1 Caractérisation générale des anthracènnosides de l’extrait total par la réaction l’acétate de magnésium
II-2-2 Caractérisation spécifique des anthracènosides de l’extrait total par C.C.M
II-3 RESULTATS DE L’ACTIVITE ANTIPARASITAIRE
II-3-1 Situation des infestations expérimentales
III DISCUSSION
III-1 Etude chimique
III- 1-1 Extraction
III-1-2 Mise en évidence des composants
III-2 Etude de l’activité antiparasitaire
III-2-1 Matériel
III-2-1-1 Choix des animaux
III-2-1-2 Produits utilisés
III-2-1-3 Infestation expérimentale des animaux
III-2-1-4 Technique d’évaluation de l’opg
III-2-3 Résultats
CONCLUSION
BIBLIOGRAPHIE
